产品简介

本公司生产的大肠杆菌 DB3.1 细胞含有 gyrA462 基因，对 λ 噬菌体的 ccdB 基因产物的毒性具有抵 抗作用，特别适用于转化和扩增包含 ccdB 基因的质粒载体。使用 pUC19 质粒检测，转化效率可达 10⁷ cfu/μg DNA.，－80 ℃ 保存几个月转化效率不发生改变。每支感受态可以酌情分装使用，降低 了实验的成本。质量稳定，使用方便，质优价廉。

产品组成

  基因型：F- gyrA462 endA1 Δ(sr1-recA) mcrB mrr hsdS20(rB-, mB-) supE44ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(SmR) xyl-5 λ- leu mtl1

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

产品特性

- DB3.1 感受态细胞具有链霉素抗性

质量控制

无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥10⁷ cfu/μg pUC19 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入 900μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。