产品简介

XL-10-Gold 是目前转化效率最高的感受态细胞，可用于大质粒或珍贵连接产物转化或构建文库。XL-10- Gold 菌株为 Hte (high transformation efficiency)基因型，是可特异性提高感受态转化效率及大质粒转化能力 的宿主菌基因型，已成功应用于 40 kb 质粒的构建。XL-10-Gold 几乎缺失了所有已知的限制酶切系统，同时缺 失了核酸内切酶(endA)，因此可以提高质粒 DNA 的产量和质量。同时，重组酶缺陷型(recA)减少了插入片段的 同源重组概率，保证了质粒的稳定性。菌株带有四环素和氯霉素抗性，并可用于蓝、白斑筛选 实验。经 pUC19 质粒转化检测，XL-10-Gold 感受态细胞的转化效率可达 10⁸ cfu/μg DNA 以上。

产品组成

基因型：Tet^R Δ(mcrA)183 Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F´ proAB lacI^q ZΔM15 Tn10 (Tet^R ) Amy Cam^R ]

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥10⁸ cfu/μg pUC19 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90 s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。