产品简介

XL2-Blue 菌株来源于 XL1-Blue 菌株，为 Hte (high transformation efficiency)基因型。Hte 是 Stratagene 开发的特异性提高感受态转化效率及大质粒转化能力的宿主菌基因型，该基因型使得 XL2-Blue 适用 于大质粒 DNA 和重组产物的转化，降低片段大小的偏爱性，多用于文库构建，并已成功应用于 40 kb 质粒的构建。recA1 和 endA1 的突变有利于插入 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取。 hsdSMR 突变导致 EcoK 核酸内切酶系统缺失，增强了外源 DNA 的稳定性和提取质量。由于携带 lacZ M15 突 变，该菌株可用于蓝、白斑筛选。此外，该菌株还携带四环素和氯霉素抗性。XL2-Blue 感受态细胞 经特殊工艺制作，pUC19 质粒检测转化效率 10⁸ cfu/μg DNA。

产品组成

基因型：Tet^R Δ(mcrA)183 Hte [F´ {proAB lacI^q lacZΔM15 Tn10 (Tet^R ) Amy Cam^R }] Δ(mcrCBhsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥10⁸ cfu/μg pUC19 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入 900μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。