产品简介

BL21 是最早开发的用于原核表达的菌株，BL21(DE3)、Rosetta、OrigamiB(DE3) 等一系列原核表达 菌株均来源于 BL21 菌株。该菌株主要用于非毒性蛋白的表达，不含 T7 RNA 聚合酶，所以不能用 于由 T7 启动子驱动的蛋白表达(如：pET 系列)；但含有大肠杆菌 RNA 聚合酶，可以用于 tac 或 trc 等使用大肠杆菌 RNA 聚合酶的原核系统的表达（如：pGEX，pMAL 质粒）。BL21 感受态细胞由特 殊工艺制作，pUC19 质粒检测转化效率达 10⁷ cfu/μg DNA。

产品组成

基因型：E. coli B F^- dcm ompT hsdS(rB ^- mB ^- ) gal [malB⁺ ]K-12(λ^S )

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

产品特性

BL21 感受态细胞是用来作为表达载体的宿主。适用于毒性蛋白的表达，适用于 Tac 启动子系统，如： pGEX， pMAL。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥10⁷ cfu/μg pUC19 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90 s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。