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- 产品名称： LwaCas13a (LwaC2c2)
- 产品货号： 32117
- 货期： 现货
- 价格与订购： 2090/10450
- 数量：
库存： 100
- 规格： 100pmol 1000pmol
- 产品信息
- 如何订购
产品简介
Cas13a核酸酶（又名 C2c2）是依赖于 RNA 介导的 RNA 内切核酸酶。在靶标单链 RNA 存在 PFS序 列的情况下，可特异地切割靶标 RNA。此外，Cas13a 还具有依赖于靶标单链 RNA 的反式切割活性 （即，旁路切割活性），可用于开发靶标核酸的快速检测试剂盒。例如，MIT 的张锋团队便利用 Cas13a 蛋白开发了名为“SHERLOCK”的下一代分子诊断系统。相比公司自主开发的依赖于 Cas12 的 HOLMES系统，SHERLOCK 所使用的 Cas13a 蛋白识别靶标 RNA 并反式切割 RNA报告探 针。一般来说，RNA 报告探针的两端分别为荧光基因和淬灭基团标记，其在被 Cas13a 切碎之后便 可以发出可被检测的荧光。类似地，可以在 RNA 报告探针的两端分别标记上 FITC（/FAM）和 Biotin，然后结合胶体金试纸条进行快速、便捷地检测。公司提供的 Cas13a 蛋白及反应缓冲液不含任何除 Cas13a 外的任何其它核酸酶活性。
产品组成
| 产品货号 | 32117-01 | 32117-03 |
| LwaCas13a Nuclease(10pmol/μL) | 100pmol(10μL) | 1000pmol(100μL) |
| 10×Cas13 Buffer | 1mL | 1mL×2 |
| Control Target RNA(100nM) | 5μL | 5μL |
| Control crRNA(500nM) | 5μL | 5μL |
| ssRNA reporter (FAM-BHQ1)(1µM) | 5μL | 5μL |
注：Target RNA，crRNA 以及 ssRNA reporter 应保存于-80 °C 以防止降解；购买本产品并不代表获得相关 CRISPR 分子诊断的专利授权！
推荐反式反应体系（20 μL）：
| 组分 | 体积 |
| 10×Cas13 Buffer | 2µL |
| 500nM crRNA | 2µL |
| 10µM Lwa Cas13a Nuclease | 0.5µL |
| 100nM Target RNA | 2µL |
| 1µM ssRNA reporter | 2.5µL |
| Nuclease-free water up to | 20µL |
| 在冰水浴上混合后，利用荧光定量PCR仪或荧光酶标仪进行检 测。Control中的ssRNA reporter为FAM荧光标记。 |
|
正对照反式切割结果：
图 1. LwaCas13a 反式切割靶标 RNA 的实验结果。 靶标 RNA 的终浓度浓度见图上所标示；反应由 ABI StepOne Plus 荧光定量 PCR 仪检测。
Note
For research use only. Not suitable for clinical or therapeutic use.
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