浏览量: 688
- 产品名称: dCas9
- 产品货号: 32102
- 货期: 现货
- 价格与订购: 1000/9000
- 数量:
- 规格: 100pmol 1000pmol
- 产品信息
- 如何订购
产品简介
来自 S. pyogenes 的 Cas9 核酸酶是依赖于 RNA 介导的内切核酸酶,可以特异地切割双链 DNA(在 DNA PAM 存在的情况下,也可以切割单链 DNA 或单链 RNA)。Cas9 切割位点位于目标序列 (target sequence)内,离 PAM(NGG)区 3 个碱基。PAM 对于 Cas9 的识别和切割都是必需的。 因为反应需要添加 RNA(sgRNA 或者 crRNA:tracrRNA),整个体系,包括 Cas9 酶都不能含有任 何 RNase 活性。其中,Cas9 中的 HNH 和 RuvC 结构域分别负责切割靶标 DNA 中与 sgRNA 配对和 非配对的链。在本产品中,Cas9 的 H840 和 D10 都被突变为 A,使 Cas9 的 HNH 和 RuvC 结构域均失活,获得 dCas9 蛋白。因此,dCas9 只有结合靶标 DNA 的活性,而没有切割靶标 DNA 的活性。
产品组成
产品货号 | 32102-01 | 32102-03 |
dCas9 | 100pmol(1pmol/μL) | 1000pmol(10pmol/μL) |
10×TOLO Buffer3 | 1mL | 1mL×2 |
推荐反应体系(20 μL):
组分 | 体 积 |
10×TOLO Buffer3 | 2µL |
250nM sgRNA | 2µL |
1pmol/µL dCas9 | 1µL |
30nM substrate DNA | 2µL |
Nuclease-free water up to | 20µL |
37°C培养30min至1h,然后通过非变性核酸电泳等方法对实验结果进行检测 |
Note
For research use only. Not suitable for clinical or therapeutic use.
SpCas9 Nuclease 下一篇