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- 产品名称: 支原体PCR检测试剂盒
- 产品货号: CSK00002
- 货期: 现货
- 价格与订购: 1800
- 数量:
- 规格: 20mg
- 产品信息
- 如何订购
概述(Summary)icon
产品英文名(Product Name)
Mycoplasma PCR Test Kit
产品中文名
支原体PCR检测试剂盒
产品描述(Description)
支原体PCR检测试剂盒是一款具有快速、灵敏、特异性高等特点的支原体检测试剂盒,可用于细胞、培养基、动物血清等的支原体检测。本产品通过聚合酶链式反应技术(PCR)特异扩增支原体16s rRNA 基因保守区域片段,进行支原体检测,能够检测包括M. arthritidis,M. hominis,M. hyorhinis,M. fermentans,M. orale,M. salivarium,M. bovis,M. bovigenitalium,M.pneumoniae,M. pirum等在内的数十种常见支原体。
储存条件(Storage)
储存于-15 ~ -25℃。
运输方式(Shipping)
干冰运输。
Note
For research use only .
使用方法(Standard Operating Procedure)icon
1. 收取待检样品。贴壁细胞:待细胞生长至80%左右即可,使用细胞刮刀刮取细胞(送检细胞不能用消化液消化细胞);悬浮细胞:待细胞生长至80%左右即可直接进入下一步离心;
2. 1000rpm离心5min,弃上清,留100-200μl培养基重悬细胞,沸水浴10min;
3. 将煮沸的细胞悬浮液12000rpm离心3-5min;
4. 所得样品取4μl直接用于PCR检测,或冻存于-20℃备用;
注:一般以6孔板接种细胞,当细胞生长至80-90%时即可取样进行检测。培养液中的青霉素和链霉素不会影响检测效果。
5. PCR检测
5.1充分融化PCR反应液,按照下表配制PCR反应体系:
组分 |
阳性对照组 |
阴性对照组 |
实验组 |
PCR反应液 |
14μl |
14μl |
14μl |
引物 |
2μl |
2μl |
2μl |
阳性对照 |
4μl |
- |
- |
待检样本 |
- |
- |
4μl |
ddH2O |
- |
4μl |
- |
5.2 将PCR反应管放入PCR仪,参照以下参数运行PCR反应程序:
程序 |
运行参数 |
循环数 |
|
预变性 |
94℃ 5min |
- |
|
循环 |
变性 |
94℃ 30s |
30 |
退火 |
55℃ 30s |
||
延伸 |
72℃ 15s |
||
延伸 |
72℃ 5min |
- |
5.3琼脂糖凝胶电泳。
6. 凝胶成像观察
注:支原体阳性细胞扩增片段约270bp。
M :marker
+ :阳性对照
- :阴性对照
1-3:检测为阳性的细胞
4-5:检测为阴性的细胞