产品简介

Rosetta-gami 2 系列菌株是集合了 Rosetta 2 系列菌株和 Origami 2 系列菌株的有点，增强了细胞内 二硫键的形成和含有在大肠杆菌中稀有密码子的真核细胞蛋白的表达能力。Rosetta-gami 2 系列菌 株是来源于 Origami 2 系列菌株。而 Origami 2 系列菌株是卡那敏感的 K-12 细胞菌株，携带有 TrxB 和 Gor 基因突变提高含二硫键正确折叠蛋白的高效表达。Rosetta-gami 2 感受态细胞经特殊工艺制 作，pUC19 质粒检测转化效率>10⁸ cfu/μg DNA。

产品组成

基因型：Δ(ara-leu)7697 lacX74 phoA PvuII phoR ara 139 ahpC galE galK rpsL F’[lac⁺ lacI^q pro] gor522::Tn10 trxB pRARE2 (Cam^R , Str^R , Tet^R )

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥10⁸ cfu/μg pUC19 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入 900μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。