产品简介

发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌，它能够 感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。Ar.Qual 发根农杆菌菌株含有农杆碱 型 Ri 质粒，具有广泛的宿主范围（玉米，烟草，番茄，柑橘等），同时具有链霉素，氯霉素抗性。 本公司生产的 Ar.Qual 化学转化感受态细胞经特殊工艺制作，pCAMBIA2301 质粒（卡那霉素抗性） 检测，转化效率≥ 10⁴ cfu/μg DNA。

产品组成

基因型：Agrobacterium rhizogenes (Str^R ,Cam^R ) Ar Qual Ri (agropine type)

存储条件

-80 ℃保存; 请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

除农杆碱型 Ri 质粒外，无外源质粒 DNA 残留

化学法转化效率≥10⁴ cfu/μg DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，用手拨打管底混匀，依次于冰上静置 10 分钟、液氮 5 分 钟（或干冰乙醇浴和-80℃冰冻）、37℃水浴 5 分钟、冰浴 5 分钟；

3.加入 900 μl 无抗生素的 YEB 液体培养基，于 28 ℃振荡培养 2~3 小时；

4. 6000 rpm 离心一分钟收菌，留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的 YEB 平板 上，倒置放于 28 ℃培养箱培养 2-3 天。

注意事项

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. Ar.Qual 具有链霉素、氯霉素抗性，不可用于具有链霉素抗性或氯霉素抗性质粒的转化；

4. 经本公司测试，该感受态具有氨苄抗性，建议勿使用带氨苄抗性的载体。