产品简介

DH10B-Plus 感受态细胞用电击法转化的效率较高，故不推荐使用热激法化学转化。DH10B-Plus 菌 株来源于 DH10B 菌株，在 DH10B 菌株中引入 Hte 突变，提高了细胞膜的通透性和对瞬时高压的 耐受进而提高了电击转化效率。DH10B-Plus 菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的 DNA (无论真核生物还是原核生物的基因组 DNA 都能被高效的转入 DH10B-Plus 中)。recA1 和 endA1 的 突变有利于插入 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取， lacZΔM15 标记的存在使 DH10B-Plus 可 用于蓝白斑筛选。DH10B-Plus 电击感受态细胞具有链霉素和四环素抗性，适用于大质粒的构建或 各种文库构建，经特殊工艺处理，pUC19 质粒检测转化效率可达 10¹⁰ cfu/μg DNA。

产品组成

基因型：F^-mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15 lacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara, leu)7697 galE15 galK λ- rpsL nupG Hte (TetR)

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥10¹⁰ cfu/μg pUC19 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，转入冰上预冷的电击转化杯中；

3. 使用电转仪进行电击转化（转化参数为：2mm 电击杯，2.5kv，200Ω，电转化时间一般为 4-5 ms 左右）；

4. 电击后迅速取出电击杯，向其中加入 900 μL 液体 LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），然 后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰上解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 不应含有较高的离子强度，建议总体积不超过 5 μl，一般为 1-2 μl；

3. 为确保最高转化效率，电转化杯一定要在冰上预冷；

4. 如使用 1 mm 电击杯，则转化参数改为 1.25 kv 和 200 Ω。