产品简介

EPI400 来源于 EC100 菌株，将 EC100 核基因中控制质粒拷贝数的 pcnB 基因改造成诱导型启动子驱动 后获得了 EPI400 菌株。EPI400 菌株可以显著降低大部分质粒的拷贝数，特别适合于各种含不稳 定 DNA 的质粒或含有毒性基因的克隆；在加入 CopyMore 400 诱导剂后可将质粒的拷贝数提高至正常 状态。mcrA 突变和 mrr-hsdRMS-mcrBC 缺失的基因型使得 EPI400 菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲 基腺嘌呤的 DNA 。recA1 和 endA1 突变有利于插入 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取。 lacZΔM15 标记的存在使 EPI400 可用于蓝白斑筛选，tonA 突变赋予其抗噬菌体 T1 和 T5 的能力， rpsL 突变赋予其链霉素抗性。经 pUC19 质粒转化检测，EPI400 感受态细胞的转化效率可达 10⁷ cfu/μg DNA。

产品组成

基因型：F^-mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 lacX74 recA1 endA1 araD139 (ara, leu)7697 galU galK λ^-rpsL (Str^R ) nupG trfA tonA pcnB dhf

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留

化学法转化效率≥10⁷ cfu/μg pUC19 DNA

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。