产品简介

该菌株属于 Novablue 衍生菌株，具有很高的质粒转化效率，也可同时表达多种稀有密码子 tRNA， 可用于真核蛋白的表达。该菌株没有整合 λ 噬菌体的 DE3 区，因此该菌株自身不能表达 T7 RNA 聚合酶，也不能用于 T7 启动子驱动的蛋白诱导表达。Rosetta Blue 感受态细胞经特殊工艺制作， pUC19 质粒检测转化效率>10⁸ cfu/μg DNA。

产品组成

基因型：endA1 hsdR17 (rK ^– mK ⁺ ) supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac F' [proA⁺B ⁺ lacI^q Z∆M15::Tn10] pRARE2 (Cam^R , Tet^R )

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制 除 pRARE2 外，无外源质粒 DNA 残留；

化 学法转化效率≥10⁸ cfu/μg pUC19 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入 900μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min； 5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。