产品简介

HB101 菌株是 E. coli K-12 菌株和 E. coli B 菌株的杂合产物（同时也是 Stbl3 的原始菌株）。该菌株携带 recA13 突变，可有效抑制长片段末端重复区的重组，降低错误重组的概率；但由于其不含核酸酶 endA1 突变，体内核酸酶含量较高，提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中的去蛋白液以去除核酸酶。hsdS20 背景使 HB101 缺失内切酶系统，增强了外源 DNA 的稳定性和提取质量；此菌株 具有链霉素抗性；不存在 lacIq ZΔM15，不可用于蓝、白斑筛选。经 pUC19 质粒转化检测，HB101 感受态细胞的转化效率可达 107 cfu/μg DNA。

产品组成

基因型：F^-mcrB mrr hsdS20 (rB^-mB^-) recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1 galK2 xyl-5 mtl-1 rpsL20 (Str^R ) glnV44 λ^-

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥10⁷ cfu/μg pUC19 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。