产品简介

大肠杆菌 JM110 菌株具有硫酸链霉素抗性(Str^R )；是甲基化基因 dam、dcm 缺失的菌株，从该菌株 中提取得到的质粒 DNA ，可被对 dam 和 dcm 甲基化敏感的内切酶切割；该菌株携带的 lacI^q lacZΔM15 突变使其可以进行蓝白斑筛选。但由于该菌株的转化效率不太高，一般不用于质粒 构建的宿主，而是用于质粒转化以便进行质粒去甲基化。经 pUC19 质粒转化检测，JM110 感受态 细胞的转化效率可达 10⁷ cfu/μg DNA 以上。

产品组成 

基因型：rpsL (Str^R ) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB) /F′ [traD36 proAB lacI^q lacZΔM15]

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥10⁷ cfu/μg pUC19 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。