产品简介

JM330 菌株(即 DH5α T1 Phage Resistant)，来源于 DH5α 菌株；通过在 DH5α 大肠杆菌基因组中引入 了 tonA 突变获得，因而具有抵抗噬菌体 T1 和 T5 的能力。JM330 菌株最大的特点是其可以在体内 特异性降解甲基化的质粒模板，被广泛应用于 DNA 定点突变实验（即反应产物在转化之前无需再 进行 DpnI 酶切处理）。JM330 菌株缺失核酸内切酶 (endA1)和重组酶(recA1)，提高了质粒 DNA 的 产量和质量； lacZΔM15 的存在使 JM330 可用于蓝、白斑筛选实验。经 pUC19 质粒转化检测， JM330 感受态细胞的转化效率可达 10⁸ cfu/μg DNA 以上。

产品组成 

基因型：F ^- φ80 lacZ∆M15 ∆(lacZYA-argF) U169 recA1 endA1 hsdR17 (rK ^- mK ⁺ ) phoA supE44 λ ^- thi-1 gyrA96 relA1 tonA

存储条件

-80 ℃保存，请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥10⁸ cfu/μg pUC19 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90 s 后，立刻置于冰浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。