产品简介

大肠杆菌 Mach1 T1 菌株由野生型 E. coli W 菌株改造而来，是目前生长速度较快的感受态细胞之一， 在平板上 培养 8h 可见克隆；该菌缺失了核酸内切酶（endA），提高了质粒 DNA 的产量和质量； 重组酶缺陷型（recA1398）减少插入片段的同源重组概率，保证了插入外源 DNA 的稳定性；菌株 携带 lacZΔM15 突变，故可用于蓝、白斑筛选；tonA 突变赋予 Mach1 T1 菌株对噬菌体 T1 和 T5 的 抗性。经 pUC19 质粒转化检测，Mach1 T1 感受态细胞的转化效率可达 10⁹ cfu/μg DNA。

产品组成

基因型：F ^- φ80(lacZ)ΔM15 ΔlacX74 hsdR (rK ^- mK ⁺ ) ΔrecA1398 endA1 tonA

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥10⁹ cfu/μg pUC19 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90 s 后，立刻置于冰浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。