产品简介

BL21(DE3)/pLysS 菌株携带 pLysS 质粒，具有氯霉素抗性。pLysS 含有表达 T7 溶菌酶的基因，T7 溶菌酶 可以作用于大肠杆菌细胞壁上的肽聚糖溶解大肠杆菌，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰 IPTG 诱导的表达，适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。该菌株染色体整合了 λ(DE3)序列，可表达 T7 RNA 聚合酶，适合于 T7 启动子系列质粒的蛋白表达。该感受态细胞经 pUC19 质粒检测，其转化效率高达 10⁸ cfu/μg DNA。

产品组成

基因型：F ^- ompT hsdS (rB ^-mB ^- ) gal dcm (DE3) pLysS Cam^R

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

产品特性

-该菌株为 recA+基因型，故不用于质粒的保存；

-属于大肠杆菌 B 株系列，可用于以 T7 RNA 聚合酶为表达系统的蛋白表达；

-pLysS 含有表达 T7 溶菌酶的基因，T7 溶菌酶可以作用于大肠杆菌细胞壁上的肽聚糖溶解大肠杆菌，能够 降低目的基因的背景表达水平，但不干扰 IPTG 诱导的表达，适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

质量控制

除 pLysS 外，无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥10⁸ cfu/μg pUC19 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90 s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。