产品简介

NovaBlue(DE3)来源于 K12 菌株，具有极高的转化效率，是转化效率最高的原核表达菌株，可同时 用于普通质粒的构建和蛋白的原核表达。NovaBlue(DE3)菌株染色体 DNA 中整合了噬菌体 λDE3 序 列，使得 NovaBlue(DE3)菌株可用于 pET 系列、pGEX、pMAL 等质粒的蛋白表达。NovaBlue(DE3) 菌株具有四环素抗性，endA1 和 recA1 的突变有利于插入 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取； lacZΔM15 突变使得 NovaBlue(DE3)可用于蓝、白斑实验筛选。经 pUC19 质粒转化检测，NovaBlue (DE3)感受态细胞的转化效率可达 10⁸ cfu/μg DNA 以上。

产品组成

基因型：F ^- [proA⁺ B ⁺ lacI^q Z M15::Tn10 (Tet^R )] endA1 hsdR17(rk12 ^- mk12 ⁺ ) supE44 thi -1 recA1 gyrA96 relA1 lac (DE3)

存储条件

-80 ℃保存，请勿将本品置于-20℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥10⁸ cfu/μg pUC19 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。