2 × Magic Green Taq SuperMix_武汉肽芯生物科技有限公司

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产品名称： 2 × Magic Green Taq SuperMix
产品货号： 21502
货期：现货
价格与订购： 419
数量：

库存： 100

规格： 10×1mL

产品信息
如何订购

产品简介

本产品包含特殊修饰的TaqDNAPolymerase、dNTP以及优化的缓冲体系，只需加入引物和模板即可进行扩增，减少了移液操作，提高了检测通量和结果的重复性。特殊修饰的TaqDNAPolymerase大大提高了扩增反应的特异性，扩增体系中加入的保护剂使得2×MagicGreenTaqSuperMix反复冻融后仍可保持稳定活性。本产品含有绿色染料，可在反应结束后直接进行电泳，方便快捷。

产品组成

组分	21502
2×MagicGreenTaqSuperMix	10×1mL

保存条件

-20℃储存，≤0℃运输。

实验流程

1.反应体系

组分	20μL体系	50μL体系
Template DNA^a	xμL	xμL
PrimerF(10µM)	1μL	2.5μL
PrimerR(10µM)	1μL	2.5μL
2×Magic Green Taq SuperMix	10μL	25μL
ddH2O	Up to 20μL	Up to 50μL

a.以50μL体系为例，推荐使用的模板量如下表：

模板类型	50 μL 反应体系推荐用量
动植物基因组 DNA	0.1 - 1 μg
大肠杆菌基因组 DNA	10 - 100 ng
质粒 DNA	0.1 - 10 ng
λDNA	0.5 - 10 ng
cDNA^b	1-5 μL

b. cDNA 模板加入体积不宜超过 PCR 反应总体积的 1/10.

2.反应程序

Stage	程序	温度	时间	循环数
Stage1	预变性^c	95℃	3min
Stage2	循环反应^d	95℃	10sec	30-35cycles
		55-65℃	10sec
		72℃	60sec/kb
Stage3	彻底延伸	72℃	5min

c. 如果模板具有复杂二级结构或高 GC 区域，可将预变性时间延长至 5 - 10 min 以提高预变性效果；

d. 循环反应中的退火温度需要根据引物的 Tm 值进行调整，一般设置成低于引物 Tm 值 3 ~ 5℃即可；对于复杂模板，需要调节退火温度和延长延伸时间来实现高效扩增。

注意事项

	无产物或少量产物	有杂带或弥散条带
模板纯度	使用高纯度模板	使用高纯度模板
模板用量	粗提样品可能需要减少使用量；其他样品模板用量参照反应体系推荐量并适量增加	模板用量参照反应体系推荐量调整
延伸时间	适当增加延伸时间	有大于目标条带的杂带时可减少延伸时间
循环数	增加循环数至35-40个循环	减少循环数至25-30个循环
退火温度	设置退火温度梯度，找到合适的退火温度	尝试提高退火温度，可间隔2℃设置至65℃
引物浓度	适当提高引物浓度	降低引物浓度至终浓度为0.2µM
引物设计	1.正向引物和反向引物的Tm值相差不超过1℃为佳，Tm值调整至55~65℃为佳(引物额外附加序列，即与模板非配对序列，不应参与引物Tm值计算)； 2.引物3′-端最后一个碱基最好为G或者C；引物3′-端最后8个碱基应避免出现连续错配；引物3′-端应避免出现发夹结构； 3.引物A、G、C、T整体分布要尽量均匀，避免使用GC或者AT含量高的区域；引物的GC含量控制在40%-60%之间； 4.避开引物内部或者两条引物之间有5个碱基以上的互补序列，两条引物的3′-端避免有3个碱基以上的互补序列；引物设计完毕建议使用NCBIBLAST功能检索引物特异性，以避免非特异性扩增产生。

Note

Forresearchuseonly.Notsuitableforclinicalortherapeuticuse.