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- 产品名称： SpCas9 H840A Nickase
- 产品货号： 32120
- 货期： 现货
- 价格与订购： 1000/9000
- 数量：
库存： 100
- 规格： 100pmol 1000pmol
- 产品信息
- 如何订购
产品简介
来自 S. pyogenes 的 Cas9 核酸酶是依赖于 RNA 介导的内切核酸酶，可以特异地切割双链 DNA（在 DNA PAM 存在的情况下，也可以切割单链 DNA 或单链 RNA）。Cas9 切割位点位于目标序列 （target sequence）内，离 PAM（NGG）区 3 个碱基。PAM 对于 Cas9 的识别和切割都是必需的。 因为反应需要添加 RNA（sgRNA 或者 crRNA:tracrRNA），整个体系，包括 Cas9 酶都必需不含任 何核酸酶活性。其中，Cas9 中的 HNH 和 RuvC 结构域分别负责切割靶标 DNA 中与 sgRNA 配对和 非配对的链。本产品中，Cas9 的 H840 被突变为 A，使 Cas9 的 HNH 结构域失活。因此，Cas9 （H840A）只有 RuvC 结构域有切割活性，是能够形成单链缺刻的 Nickase。
产品组成
| 产品货号 | 32120-01 | 32120-02 |
| Cas9(H840A) | 100 pmol (1 pmol/μL) | 1000 pmol (10 pmol/μL) |
| 10×TOLO Buffer 3 | 1 mL | 1 mL × 2 |
注：sgRNA 应保存于-80 °C 以防止降解。
推荐反应体系（20 μL）：
| 组分 | 体积 |
| 10×TOLO Buffer 3 | 2 µL |
| 250 nM sgRNA | 2 µL |
| 1 µM Cas9(H840A) | 1 µL |
| 30 nM substrate DNA | 2 µL |
| Nuclease-free water upto | 20 µL |
| Incubate at 37 °C for 1 h, 85 °C 10 min | |
Note
For research use only. Not suitable for clinical or therapeutic use.
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