产品简介

2× DreamPfu Premix 是将 PCR 反应用到的高保真 DreamPfu DNA 聚合酶、buffer、dNTP Mixture 以及稳定剂以 2 倍的终浓度进行混合。 使用时，只需在制品溶液中加入模板和引物便可进行 PCR 反应，大大简化了操作过程，降低了 PCR 操作过程中污染的可能性。 

产品组成 

 预混液可置于 4 ℃保存；若要长期保存，如 6 个月以上，则应置于-20 ℃。避免反复冻融。

产品质控

（1）性能检测 1：在 50 μL PCR 反应体系加入 25 μL premix、100 ng Human RP11 13M9-pBACe3.6 质粒，扩增 15 kb 的 DNA 目的片段，在 30 个循环扩增后经 1%琼脂糖凝胶检测可在 15 kb 处检测到较亮的单一目的条带。

（2）性能检测 2：在 50 μL PCR 反应体系加入 25 μL premix、大肠杆菌菌落，扩增 5 kb 的 DNA 目的片段，在 30 个循环扩增后经 1%琼脂糖凝胶检测可在 5 kb 处检测到较亮的单一目的条带。

（3）大肠杆菌核酸残留检测：在 20 μL 荧光定量 PCR 反应体系加入 10 μL premix（无染料）和大肠杆菌特异基因扩增引物（如 gapA）；在不加入大肠杆菌 DNA 模板的情况下，20 个循环内荧光信号值在基线范围。

常规 PCR 反应体系：

1. 在冰浴上设置 PCR 反应（供参考）*：

模板:                                                 < 500 ng

2× DreamPfu Premix:                      25 μL

Primer 1/2:                                      0.2 - 1.0 μM (final conc.)

灭菌蒸馏水 Up to 50 μL

2. PCR 反应参数（供参考）**：

(起始变性):                                        95 ℃ 5 min

(解链):                                               98 ℃ 5 sec

(退火):                                               55 ℃ 30 sec

(延伸):                                               72 ℃ x min （30-35

循环：                                               2 kb/min）

(最终延伸):                                        72 ℃ 7 min (临时保存): 16 ℃ 保温 

* 针对不同类型的模板，所需的模板量会有不同，如基因组和质粒，等等；需要根据实际情况，添加合适的模板量。

** 退火温度需根据引物和模板实际的 G+C 含量来作调整。 

Note
For research use only. Not suitable for clinical or therapeutic use.