产品简介

Shuffle T7 Express lysY 来源于大肠杆菌 B 菌株，在染色体上组成型表达二硫键异构酶 DsbC，该酶 可帮助二硫键错误折叠的蛋白形成正确的构型，从而促进胞质中的含二硫键蛋白的高效表达；同时， 该菌株也适合表达毒性蛋白。此外，Shuffle T7 Express 有 Cam、Nit、Spec 和低浓度 Str 的抗性， 也可抵抗噬菌体 T1(fhuA2)噬菌体的侵染。经 pUC19 转化检测，Shuffle T7 Express lysY 感受态细胞 的效率可达 10⁸ cfu/μg DNA 以上。

产品组成

基因型：MiniF lysY (Cam^R )/fhuA2 lacZ::T7 gene1 [lon] ompT ahpC gal λatt::pNEB3-r1-cDsbC (Spec^R , lacI^q ) trxB sulA11 R(mcr-73::miniTn10--Tet^S )2 [dcm] R(zgb-210::Tn10 --Tet^S ) endA1 gor ∆(mcrC-mrr)114::IS10

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留

化学法转化效率≥10⁸ cfu/μg pUC19 DNA

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。