产品简介

T7 Express 菌株为大肠杆菌 BL21 增强型菌株，为 Lon 和 OmpT 蛋白酶缺陷型，主要适用于含有 T7 启动子的原核表达载体(如 pET 等)的蛋白表达，同样适用于需要利用大肠杆菌自身 RNA 聚合酶来转录 RNA 的非 T7 启动子的表达载体（如 pGEX 等）。该菌株区别于 BL21(DE3)菌株的优势在于 T7 RNA 聚 合酶基因整合在细菌染色体上的 lac 操纵子区域，基因组中无 λ 前噬菌体序列，并具有抗 T1 噬菌体感 染等特点。T7 Express 表达感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19 质粒检测转化效率大于 10⁸ cfu/μg DNA。

产品组成

基因型：fhuA2 lacZ::T7 gene1 [lon] ompT gal sulA11 R(mcr-73::miniTn10--Tet^S )2 [dcm] R(zgb-210::Tn10- - Tet^S ) endA1 (mcrC-mrr)114::IS10

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥10⁸ cfu/μg pUC19 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入 900μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），然后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。