产品简介

T7 Express LysY/Iq 菌株适合于高效转化和蛋白表达的化学活性大肠杆菌细胞。lacl^q 对表达的严格 控制允许克隆潜在毒性基因，溶菌酶控制 T7 RNA 聚合酶可以表达毒性基因，LysY 是 T7 溶菌酶 的一个变体，缺乏任何酰胺酶活性，因此细胞在诱导过程中对裂解不太敏感。溶菌酶/lacI^q 质粒的维持不需要抗生素选择，缺乏蛋白酶 Lon 和 OmpT 。抗噬菌体 T1（ fhuA2）。不限制甲基化 DNA(McrA-、McrBC-、EcoBr-m-、Mrr-)。经 pUC19 质粒转化检测，T7 Express LysY/Iq 感受态细 胞的转化效率可达 10⁸ cfu/μg DNA。

产品组成

基因型：MiniF lysY lacI^q (Cam^R ) / fhuA2 lacZ::T7 gene1 [lon] ompT gal sulA11 R(mcr-73::mini Tn10--Tet^S )2 [dcm] R(zgb-210::Tn10--Tet^S ) endA1 Δ(mcrC-mrr) 114::IS10

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

除 pRARE 外，无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥10⁸ cfu/μg pUC19 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。