产品简介

Tuner 系列菌株是 lacZY 删除的 BL21 突变菌株，其中 lacY 的突变使得 IPTG 能够进入所有细胞的胞 内，从而使得蛋白的诱导水平具有 IPTG 的浓度依赖性。当与 pET 系列载体联合使用时，可使蛋白的 表达量从低表达水平到超高表达水平的范围内进行有效的调节；而在蛋白表达水平低的情况下， 目的蛋白可能会呈现更好的可溶性和活性。因此，Tuner 系列菌株的蛋白表达水平可以通过 IPTG 浓度来进行精确而严谨的调控。此外，Tuner 系列菌株还是 Lon 和 OmpT 蛋白酶缺陷型菌株。由于 该菌株不含有 λDE3 序列，不表达 T7 RNA 聚合酶，因此不能用于 T7 启动子系列质粒的蛋白表达。 经 pUC19 质粒转化检测，Tuner 感受态细胞的转化效率可达 10⁸ cfu/μg DNA。

产品组成

基因型：F ^- ompT hsdSB (rB ^- mB ^- ) gal dcm lacY1

存储条件

-80 ℃保存；请勿将本品置于-20 ℃或者液氮中保存。

质量控制

无外源质粒 DNA 残留；

化学法转化效率≥10⁸ cfu/μg pUC19 DNA。

使用方法

1. 将感受态细胞从-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；

2. 将待转化 DNA 加入到 100 μL 感受态细胞中，轻轻弹匀，冰上孵育 30 min；

3. 将离心管置于 42 ℃水浴锅中，不要晃动，热激 90s 后，立刻置于冰水浴中静置 2-3 min；

4. 向离心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培养基（室温或 37 ℃预热），后置于 37 ℃摇床复壮 45 min；

5. 取不同体积的转化产物，用无菌涂布棒均匀涂布于正确抗性的平板上，于 37 ℃培养箱培养过夜。

注意事项

1. 感受态细胞冰水浴中解冻后应立即使用；

2. 加入的待转化 DNA 的总体积不应超过感受态细胞体积的 1/10；

3. 加入待转化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受态细胞，仅用手指轻弹即可；

4. 为确保最高转化效率，整个操作过程中除热激外均要保持低温，并且要尽量轻柔。